目的探討急性早幼粒細(xì)胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)患者治療前后血漿H2S濃度變化及意義。方法隨機(jī)選取初治APL住院患者26例為病例組，健康體檢者26例為對照組。去蛋白法測定血漿H2S濃度，比較病例組患者急性發(fā)病期、臨床緩解期血漿H2S濃度與健康對照組之間的差異。結(jié)果病例組患者急性發(fā)病期血漿H2S濃度明顯升高，與臨床緩解期和對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；病例組經(jīng)治療后進(jìn)入臨床緩解期的患者血漿H2S濃度下降，接近健康對照組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.01)。結(jié)論內(nèi)源性H2S參與了APL發(fā)生發(fā)展的病理生理過程。

目前研究發(fā)現(xiàn)氣體信號分子H2S在人體具有重要的生理和病理生理調(diào)節(jié)作用，并與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)。但有關(guān)H2S與急性早幼粒細(xì)胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)關(guān)系的研究報道少見。我們檢測了初治APL患者治療前后血漿H2S濃度的變化，探討H2S在APL發(fā)病過程中的作用及意義。

1材料與方法

1.1一般資料

選取2014-01-01—2014-12-31河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院收治的初治APL住院患者26例為病例組，診斷及療效判斷均符合《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》，其中男12例，女14例；年齡19～52歲，中位年齡35歲；經(jīng)治療后，臨床緩解病例22例，其中男9例，女13例。選取同期體檢中心健康體檢者26例為對照組，其中男12例，女14例；年齡22～50歲，中位年齡36歲。均排除心、腦、肺等主要臟器疾病。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集晨起抽取空腹靜脈血2 mL，置EDTA-K2抗凝管，3 000 r·min-1離心10 min，吸血漿至EP管，置-75℃低溫冰箱保存，待測H2S濃度。病例組中22例臨床緩解病例治療緩解后抽血復(fù)查。

1.2.2測定方法測定前血清標(biāo)本室溫復(fù)融，3 000 r·min-1離心10 min，取上清液，去蛋白法檢測H2S濃度。首先用不同濃度NaHS標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，直線回歸方程為：Y=1513.1X±2.362，r2=0.998。反應(yīng)在5 mL玻璃試管中完成，按序加入以下試劑：首先在玻璃試管中加入10 g·L-1醋酸鋅0.5 mL，然后加入血漿標(biāo)本0.1 mL，振蕩搖勻，再依次加入20 mmol·L-1對苯二胺鹽酸鹽0.5 mL和30 mmol·L-1三氯化鐵0.5 mL，室溫孵育20 min使其充分反應(yīng)，再加入1 mL 10%三氯醋酸使蛋白沉淀，最后加入2.5 mL蒸餾水補足體積至5mL，再次充分混勻，6 000 r·min-1離心5 min，吸出上清液，722分光光度計在670 nm波長處測吸光度，根據(jù)繪好的H2S標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出上清液中H2S含量，單位:μmol·L-1。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

2結(jié)果

APL患者急性發(fā)病期H2S濃度為(88.32±7.12)μmol·L-1，臨床緩解期H2S濃度為(46.75±5.94)μmol·L-1；正常對照組H2S濃度為(45.8±6.11)μmol·L-1。病例組急性發(fā)病期與正常對照組相比H2S含量明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；臨床緩解期與急性發(fā)病期相比H2S含量明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P&lt;0.01)；臨床緩解期與正常對照組相比H2S含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

3討論

H2S是毒性氣體，近年研究發(fā)現(xiàn)H2S在人體內(nèi)也有產(chǎn)生，是人類發(fā)現(xiàn)的第三個氣體信使分子，是在體內(nèi)由含硫氨基酸如同型半胱氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸等在磷酸吡多醛-5’-磷酸依賴性酶(包括CBS、CSE)、半胱氨酸轉(zhuǎn)移酶等催化作用下產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。有研究表明內(nèi)源性H2S參與了許多臨床疾病的病理生理過程，例如腎病、左心室肥厚、腦梗死、腫瘤、胰腺炎等。

本研究發(fā)現(xiàn)APL急性發(fā)病期患者血漿H2S濃度明顯升高，經(jīng)治療緩解后H2S濃度回降至接近正常對照組，表明內(nèi)源性硫化氫H2S參與了APL的病理生理過程。其機(jī)制我們認(rèn)為可能為：①某種原因?qū)е律蒆2S的原料(如同型半胱氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸)增加；②生成H2S的酶(如CBS、CSE等)生成增多和(或)活性升高；③H2S在體內(nèi)的清除速度減緩。研究發(fā)現(xiàn)H2S對多種癌細(xì)胞增殖與凋亡有調(diào)節(jié)作用，在APL急性發(fā)病期，可能由于某種負(fù)反饋機(jī)制的存在，導(dǎo)致H2S濃度升高，升高的H2S促進(jìn)了APL細(xì)胞凋亡并抑制了其增殖，減緩了APL的發(fā)展速度，是機(jī)體自我保護(hù)機(jī)制之一。臨床緩解期患者血漿H2S濃度降至接近正常水平，表明了這種負(fù)反饋機(jī)制的存在。至于確切原因，有待進(jìn)一步深入研究。