白蟻,這些看似不起眼的小昆蟲,其實是自然界了不起的工程師和分解者。它們能消化堅硬的木頭,這離不開它們腸道里一個龐大而復(fù)雜的微生物世界。這篇科普文章將帶您了解科學(xué)家們?nèi)绾卫酶呖萍脊ぞ?,特別是Unisense微電極,深入探索一種以木材為食的高等白蟻(Nasutitermes屬)的腸道環(huán)境,揭示了其腸道如同一個高度分工的“生物工廠”的秘密。

一、研究簡介:白蟻腸道里的微生物王國

高等白蟻(比如筑丘的象白蟻)的腸道與我們熟悉的螞蟻或蜜蜂不同,它們沒有幫助消化木頭的微小單細(xì)胞原生動物伙伴。它們完全依靠細(xì)菌來完成這項艱巨的任務(wù)!更特別的是,它們的腸道被分隔成幾個連續(xù)的“小房間”(隔室),每個隔室都有著不同的環(huán)境條件和居住著獨特的細(xì)菌群落??茖W(xué)家們一直想了解:這些不同的“房間”里,氧氣、酸堿度、甚至氫氣的濃度具體是怎樣的?什么樣的細(xì)菌住在里面?它們各自承擔(dān)什么工作?這項研究使用了一種強大的工具——Unisense微電極,像給白蟻腸道做“精密體檢”一樣,詳細(xì)測量了這些環(huán)境參數(shù),并結(jié)合DNA測序技術(shù),繪制了每個“房間”的“住戶名單”(細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)),揭示了這些“微型生物工廠”如何高效協(xié)作,分解堅硬的木頭。

二、顯微探針:潛入白蟻腸道的精密探測器(Unisense微電極實驗方法)

為了精確測量白蟻腸道內(nèi)部那極其微小的環(huán)境變化,科學(xué)家們使用了丹麥Unisense公司制造的尖端設(shè)備——微電極。這些電極的尖端非常細(xì),直徑只有大約10微米(比頭發(fā)絲細(xì)得多),能夠深入白蟻腸道的不同部位進行測量。

實驗操作流程如下:

準(zhǔn)備樣品:小心地將白蟻解剖,取出完整的腸道。

固定腸道:把取出的腸道平鋪在含有瓊脂糖(一種類似于果凍的物質(zhì))的微型腔室中,并用更薄的瓊脂糖覆蓋固定。這樣能讓腸道保持自然形狀,同時允許微電極順利插入。

安裝電極:將不同類型的Unisense微電極(包括測量氧氣的OX-10電極、測量氫氣的H2-10電極、測量pH值的PH-10電極和測量氧化還原電位的RD-10電極)安裝在精密的顯微操縱器上。

精確定位:在立體顯微鏡的觀察下,手動操控顯微操縱器,將微電極的尖端精確地定位到腸道內(nèi)想要測量的具體位置(例如腸道中心或特定隔室)。

實時測量:將電極尖端小心地插入腸道,開始記錄實時的氧氣分壓、氫氣分壓、pH值和氧化還原電位。測量通常在腸道固定后約10分鐘內(nèi)開始,整個過程不到1小時,以保證腸道組織的活性。

圖1:Nasutitermes corniger的腸道。腸道包括嗉囊(C)、中腸(M)、混合段(ms)和幾個后腸節(jié)段(P1至P5);星號(*)標(biāo)記P2(幽門瓣)的位置。

圖2:在瓊脂糖包埋的Nasutitermes corniger前部P3隔室中,相對于瓊脂糖表面的氧氣(O)和氫氣(O)分壓的徑向分布圖。虛線標(biāo)出了近端和遠(yuǎn)端腸壁的位置。這些曲線是從不同白蟻身上獲得的六組相似結(jié)果中選出的典型代表。

三、腸道探秘:微電極揭示的環(huán)境地圖

利用Unisense微電極,科學(xué)家們繪制出了白蟻腸道內(nèi)部環(huán)境的精細(xì)地圖,發(fā)現(xiàn)了驚人的差異:

氧氣與缺氧區(qū):沿著腸道一路測量,發(fā)現(xiàn)氧氣濃度變化劇烈。只有那個膨大的后腸囊(P3隔室,尤其是前部)是完全缺氧的區(qū)域,像個密封的發(fā)酵罐。腸道壁附近就像一個“氧氣吸收層”,能阻止氧氣進入P3深處。如果覆蓋的瓊脂糖太?。?amp;lt;2mm),這個“罐子”也會漏進氧氣。其他腸道部分(如P1、P4)則含有氧氣。

氫氣工廠:氫氣這種易燃?xì)怏w,只在缺氧的P3隔室(尤其是前部)大量積累,中心濃度最高(在實驗室測量中最高可達12千帕,相當(dāng)于大氣壓的12%!在活體測量中較低,約0.1-2.4千帕)。這說明P3是腸道內(nèi)主要的產(chǎn)氫中心。

酸堿性過山車:腸道的酸堿度(pH)變化如同過山車:

嗉囊(C):略偏酸。

中腸(M):接近中性。

混合段/P1隔室:急劇變堿!P1隔室是最堿的地方,pH高達9.3-10.9,比家用漂白劑還堿!

P3隔室:酸堿度下降到中性。

后腸后部(P4,P5):保持中性或略偏酸。

化學(xué)活性指標(biāo)(氧化還原電位):與氧氣狀況對應(yīng)。缺氧的P3隔室化學(xué)環(huán)境適合還原反應(yīng)(電位為負(fù)值),而含氧的隔室則適合氧化反應(yīng)(電位為正值)。

總結(jié):高度分工的腸道生物工廠

這項利用Unisense微電極和其他技術(shù)的研究,為我們清晰地描繪了高等白蟻腸道這個神奇的“微型生物工廠”:

嚴(yán)格分工:腸道被物理分隔成不同的“車間”(隔室),每個車間都有獨特的環(huán)境(氧氣、pH、氧化還原電位)。

核心發(fā)酵罐:膨大的后腸囊(P3)是核心“發(fā)酵車間”。這里是唯一完全缺氧的區(qū)域,積累了高濃度的氫氣,細(xì)菌數(shù)量最多,最密集,是木材分解和發(fā)酵的主要場所。這里的“主力工人”是螺旋體菌(Spirochaetes)、纖維桿菌(Fibrobacteres)和TG3候選門的細(xì)菌,它們很可能負(fù)責(zé)分解木頭纖維并產(chǎn)生氫氣。

其他特色車間:

強堿消毒間(P1):pH值極高(~10),形成一個獨特的強堿性環(huán)境,居住著適應(yīng)這種環(huán)境的特殊細(xì)菌(如Turicibacter和一些乳酸菌)。

后部加工間(P4/P5):細(xì)菌數(shù)量比P3少很多,但群落結(jié)構(gòu)獨特,多樣性高。這里的細(xì)菌可能負(fù)責(zé)處理來自P3的物質(zhì),或適應(yīng)腸道后段的環(huán)境。其群落結(jié)構(gòu)與嗉囊有相似之處,表明白蟻可能存在吃回自己糞便(食糞性或肛飼)的行為,以回收營養(yǎng)物質(zhì)。

前段準(zhǔn)備間(嗉囊/中腸):嗉囊細(xì)菌群落多樣;中腸則被少數(shù)幾種厚壁菌門(主要是毛螺菌科Lachnospiraceae)主導(dǎo),可能參與消化或自身被宿主消化吸收。

Unisense微電極技術(shù)在這次研究中發(fā)揮了關(guān)鍵作用,如同在微觀世界中航行的精密探測器,讓科學(xué)家能夠直接“看到”并量化白蟻腸道內(nèi)這些微米尺度上的環(huán)境變化(O?,H?,pH,氧化還原電位)。這些精確的環(huán)境數(shù)據(jù),結(jié)合微生物群落分析,使我們能夠推斷不同細(xì)菌在各自“車間”中的可能功能,極大地深化了我們對白蟻如何依賴其腸道微生物伙伴高效分解木質(zhì)纖維素這一自然奇跡的理解。這些發(fā)現(xiàn)不僅有趣,也可能為未來開發(fā)生物能源(如利用產(chǎn)氫細(xì)菌)或新型酶制劑提供寶貴的靈感。