摘要

背景：眾所周知，內(nèi)皮抑素療法可有效抑制血管生成和內(nèi)皮細(xì)胞生長。然而，內(nèi)皮抑素與化療相結(jié)合的抗腫瘤機(jī)制仍有待闡明。

研究方法：在我們的研究中，我們建立了路易斯肺癌移植小鼠模型，并用重組人[rh]內(nèi)皮抑素(Endostar)與吉西他濱按不同順序聯(lián)合治療。通過18F-FDG PET/CT成像監(jiān)測腫瘤生長，并使用丹麥Unisense氧微電極檢測腫瘤缺氧情況。通過免疫組化分析檢測血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)水平，并用流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期分布。

結(jié)果：Endostar降低了血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)，改善了缺氧狀況，并影響了細(xì)胞周期分布。Endostar和吉西他濱同時治療可顯著抑制腫瘤，F(xiàn)DG攝取量最低，氧分壓得到改善，血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)減少，周細(xì)胞覆蓋率增加。細(xì)胞周期分析表明，吉西他濱治療后細(xì)胞在S期聚集，而Endostar治療后細(xì)胞在G0/G1期停滯。在使用Endostar和吉西他濱治療后，觀察到G0/G1期細(xì)胞增多。

結(jié)論：我們的研究表明，Endostar與吉西他濱同時進(jìn)行聯(lián)合治療可最大程度地增強(qiáng)各自的抗腫瘤效果。

引言

肺癌是全球發(fā)病和死亡的主要原因。在中國，非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)占肺癌病例的80%，化療在晚期NSCLC的治療中發(fā)揮著重要作用。吉西他濱是一種細(xì)胞周期特異性抗癌藥，與鉑類藥物一起用于治療非小細(xì)胞肺癌。然而，由于吉西他濱的副作用大，且易產(chǎn)生耐藥性，其治療效果有限。

腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移取決于血管新生，而血管新生受血管生成因子和抗血管生成因子的雙重控制。特別是當(dāng)實(shí)體瘤的直徑超過2毫米時，癌細(xì)胞就會開始分泌促血管生成因子，從而確保腫瘤的生長和發(fā)展。目前，已知有幾種分子可促進(jìn)腫瘤的血管生成，包括血管內(nèi)皮生長因子A(VEGF-A)、胎盤生長因子(PGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)，新生血管為腫瘤提供氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)。因此，血管生成抑制劑已成功治療了部分癌癥患者，更多的臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中，以增加可用于癌癥治療的血管生成抑制劑的種類。

內(nèi)皮抑素是一種源自X VIII膠原20-KDa C端片段，在內(nèi)源性血管生成抑制劑中具有最廣泛的抗癌譜。重要的是，人類基因組中超過12%的血管生成調(diào)控基因受內(nèi)皮抑素調(diào)控。盡管調(diào)控內(nèi)皮抑素的分子機(jī)制尚不清楚，但各種研究表明，內(nèi)皮抑素可以阻斷細(xì)胞對血管生成分子(如血管內(nèi)皮生長因子和生長因子)的反應(yīng)，進(jìn)而抑制血管內(nèi)皮的增殖和遷移。鑒于內(nèi)皮抑素類藥物已被證明缺乏療效，2005年美國食品藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)了一種在大腸桿菌中表達(dá)的新型人重組(rh)內(nèi)皮抑素，名為Endostar(rh-endostatin)，用于治療NSCLC。值得注意的是，與內(nèi)皮抑素相比，Endostar的穩(wěn)定性和生物活性大大提高。

腫瘤血管的結(jié)構(gòu)和功能本質(zhì)上是異常的，導(dǎo)致腫瘤微環(huán)境缺氧且具有高通透性。盡管人們對抗血管生成存在傳統(tǒng)看法，但Jain等人發(fā)現(xiàn)，抗血管生成療法可以降低腫瘤血管密度，增加周細(xì)胞覆蓋率，誘導(dǎo)腫瘤血管結(jié)構(gòu)，使血管功能恢復(fù)正常。此外，這些血管結(jié)構(gòu)的變化還能減少腫瘤血管的滲漏，從而改善腫瘤的缺氧環(huán)境。在這一腫瘤發(fā)生期，抗癌治療如果與放療或化療模式結(jié)合使用，效果會更好。以往的研究表明，除非與化療聯(lián)合使用，否則單獨(dú)使用內(nèi)皮抑素并不能有效抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。例如，Zhu等人發(fā)現(xiàn)，當(dāng)Endostar與放療聯(lián)合使用時，可以更有效地抑制食管鱗癌。

此外，Ren等人的研究表明，在B16-F10黑色素瘤細(xì)胞系或A549 NSCLC細(xì)胞系的腫瘤中，內(nèi)達(dá)星與環(huán)磷酰胺(CTX)和順二氨基二氯鉑(DDP)具有相加效應(yīng)。然而，腫瘤血管正?；倪^程是短暫的，而且由于血管生成調(diào)控機(jī)制的復(fù)雜性，內(nèi)司他與化療聯(lián)合治療的最有效給藥方案尚不明確；因此，內(nèi)司他的最佳給藥方案對于改進(jìn)NSCLC治療方案非常重要。本研究致力于在小鼠路易斯肺癌(LLC)異種移植癌癥模型中確定內(nèi)司他與吉西他濱的最佳聯(lián)合治療方案。